銀水灣論壇會(huì)議筆記|李孝文:豬藍(lán)耳病群體內(nèi)監(jiān)測(cè)與凈化技術(shù)研究與應(yīng)用
李博士主要從PRRSV臨床常用監(jiān)測(cè)與診斷方法、口咽拭子采樣方法及工具的開發(fā)、口咽拭子PRRSV早起診斷及監(jiān)測(cè)有效性驗(yàn)證幾個(gè)方面與各位同仁作出分享。
一、PRRSV臨床常用監(jiān)測(cè)與診斷方法
1.PRRSV群體及監(jiān)測(cè)方法要求
根據(jù)美國(guó)豬獸醫(yī)協(xié)會(huì)(AASV)的分類指南:PRRSV感染狀態(tài)群體分類的修改意見(2011),將豬群分為以下幾個(gè)等級(jí):
l陽(yáng)性不穩(wěn)定,高流行率(Ⅰ-A)
l陽(yáng)性不穩(wěn)定,低流行率(Ⅰ-B)
l陽(yáng)性穩(wěn)定(Ⅱ)
l陽(yáng)性穩(wěn)定-免疫疫苗(Ⅱ-vx)
l趨于陰性(Ⅲ)
l陰性(Ⅳ)
類別判定與維持的主要監(jiān)測(cè)樣品包括:
種豬血清、仔豬血清、仔豬睪丸處理液、仔豬家庭(窩)口腔液。
2.PRRSV常用采樣監(jiān)測(cè)方法
在非瘟背景下,場(chǎng)內(nèi)采樣操作關(guān)注檢測(cè)效果的同時(shí),也更應(yīng)關(guān)注操作的安全性(防止交叉污染)。根據(jù)監(jiān)測(cè)的目標(biāo),選擇合適的采樣方式,事半功倍。

ü雖然群體樣品可覆蓋更多的豬只,提升檢測(cè)的靈敏性,但僅適用于哺乳仔豬和大欄飼養(yǎng)豬群。無(wú)法覆蓋限位欄母豬。
ü母豬場(chǎng)適用于限位欄個(gè)體母豬監(jiān)測(cè)主要為血液及外周樣品。
ü扁桃體的刮取物似乎更適合,然而與采集血液類似需要對(duì)母豬進(jìn)行保定,不適用于大范圍應(yīng)用。
二、口咽拭子采樣方法及工具的開發(fā)
1.非洲豬瘟早起診斷與檢測(cè)技術(shù)開發(fā)
2019年的一個(gè)田間ASFV檢測(cè)案例中,表明感染早期,口咽拭子ASFV檢出更早,檢出概率更高。
2.口咽拭子采樣工具
團(tuán)隊(duì)自制工具(梨形咽拭子取樣棒)提高采樣效率、較少交叉、降低成本。采樣棒在現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用得到很好的反饋。

三、口咽拭子PRRSV早期診斷及監(jiān)測(cè)有效性驗(yàn)證
1.攻毒豬不同類型樣本中PRRSV的檢測(cè)(2021年)
仔豬攻毒28d內(nèi),口腔拭子相較于其他外周拭子和血液檢出更早,持續(xù)時(shí)間更長(zhǎng)。在仔豬出現(xiàn)病毒血癥期間,血液樣品Ct值低于外周樣品;口腔拭子PRRSV核酸檢出Ct值持續(xù)性低于其他外周拭子。


2.田間生長(zhǎng)豬不同類型樣本PRRSV的檢測(cè)(2021年)

3.田間生產(chǎn)母豬血液與口咽拭子PRRSV的檢測(cè)(2022年)


四、總結(jié)
1.在實(shí)驗(yàn)和現(xiàn)場(chǎng)條件下,與鼻拭子(NSs)、口腔液拭子(OFs)、直腸拭子(PSs)和血清樣本相比,口咽拭子(OSs)在較長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生更高的PRRSV陽(yáng)性率。
2.在使用口咽拭子工具收集口咽拭子,飼養(yǎng)在限位欄中的母豬不需要約束。
3.通過50個(gè)養(yǎng)豬場(chǎng)母豬口咽拭子和血清樣本的檢測(cè)結(jié)果分析,進(jìn)一步證實(shí)了口咽拭子在母豬群中PRRSV檢出率更高
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